培養基養菌,長得越快越好嗎?

細菌在不同培養基中的生長速度各不相同,就算是同一種細菌也不一樣。這是因為不同培養基的營養成分不同、抗菌成分不同、酸鹼值不同,簡單來說,就是生長條件不同。不過,讓細菌長得越快的培養基,就是越適合您的培養基嗎?以下就常見的三種長得快和三種長得慢的培養基跟您介紹它們的特點和應用。

長得快:

1. SOB/SOC : 這兩款培養基是常用來做為勝任細胞(competent cell)復甦的培養液。由於勝任細胞(細菌或酵母菌)在經過質體轉入實驗後非常脆弱,此時就需要具有高營養成分的培養液讓它復甦,這時候長得快的環境就是微生物們需要。SOC比SOB多了葡萄糖,對一些載體來說,葡萄糖具有抑制表達的作用,所以在SOC中復甦的微生物就不會多耗能去產生蛋白,而有更好的復甦率。除了用作復甦營養液,SOB由於高營養、含鎂離子,也被用於細菌表達蛋白的實驗中。

2. Soypeptone LB:此款培養基是由LB改良而來,它的tryptone都由soypeptone取代。Soypeptone LB的營養成分比LB高出許多,大多通用菌種在其中的生長速度都大幅度增加。此外,Soypeptone也被證實能強化許多載體表現,因而Soypeptone LB也被用在細菌蛋白生產當中。

3. 2xYT:2xYT為高營養成分培養基,一開始是被用於培養E. Coli和M13和其他單股DNA噬菌體。後來由於其高營養的特點,非常有利於DNA擴增和表達重組蛋白,也被用於表達細菌重組蛋白。

長得慢:

4. PCA:是最常用來檢測總生菌數的培養基。它的營養成分相對於LB來說,都只有一半不到,因此可以讓待測物中的菌在裡頭慢慢生長。長得太快對於檢測總生菌數來說並不是好事,因為當細菌長得太快時,某些菌種會非常強勢的生長,因而占具了培養皿的版面,還會抑制其他生長較慢的菌生長。

5. R2M:此款培養基的概念和PCA類似,就是要讓培養的微生物慢慢生長,避免強勢種類抑制了其他種類生長。比較特別的是,R2M培養基中加入了可溶性澱粉,可以吸收微生物生長過程中排放出來的廢物(有些有害物質),因而可以長期培養。依具不同實驗的需要,R2M還可以用於低溫培養,譬如33度、30度或是更低。

6. TB:此款培養基非常特別,雖然TB的營養成分比LB高出幾倍,但卻是被歸類為長得慢的培養基。這是因為如果只是提高營養成分的量,大腸桿菌可能會長得過快,面臨酸化而死亡。不過,TB培養基中加了磷酸二鉀和磷酸一鉀作為緩衝液,以及使用甘油當作大腸桿菌的碳源,因而讓大腸桿菌可以生長較慢,但長較久。不過,雖然長得慢,但在TB中可以長較久,所以最終獲得的菌量可以比一般LB培養液多2-4倍。基於以上特點,TB培養基常被用於轉基因的大腸桿菌(DH5α)培養,用來大量表達蛋白。

相關產品連結:  SOC/SOB、Soypeptone LB2xYTPCA、R2A、TB

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